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淺談酶聯免疫吸附試驗實驗教學思考的分析論文
【摘要】酶聯免疫吸附試驗是廣泛應用于臨床檢驗診斷的免疫學檢驗技術，實驗教學中采用該技術檢測“乙肝兩對半”。為適應中職生教育人才培養模式的教學改革，使學生符合具有“理論知識適度、技術應用能力強”的要求，我們對實驗教學內容和方法進行改革，從適用性角度選題，通過實驗操作考核，采取以考促學的手段，加強酶聯免疫吸附試驗的訓練力度，提高學生實驗操作能力，培養學生獨立工作的能力。
【關鍵詞】酶聯免疫吸附試驗；免疫學檢驗；實驗；考核
酶聯免疫吸附試驗(enzyme－linkedimmunosorbentassay，ELISA)是廣泛應用于臨床檢驗診斷的免疫學檢驗技術。該技術集基本理論、基本技能為一體，能使學生能對前期所學的理論知識及技能進一步加強和提高，是一個能為學生進人臨床實習打好基礎的系統實訓。目前該技術的臨床檢測多采用商品化的ELISA試劑盒，實驗步驟較少，操作簡單。然而，參與反應的成分很多，如抗原抗體濃度、酶結合物濃度以及試劑的質量控制等等，影響因素眾多。傳統的實驗教學中，實驗材料的準備、儀器的準備及調試、標本及試劑的處理等工作基本上是由教師包辦。實驗的許多環節學生沒有親自做，因而在實驗完成后，部分學生對實驗還是一知半解，更談不上能力的鍛煉和培養［1］。為適應中職生教育人才培養模式的教學改革，使學生符合具有“理論知識適度、技術應用能力強”的要求，對免疫學檢驗實驗教學內容和方法進行改革勢在必行。為此我們通過實驗技能操作考核，采取以考促學的手段，加強了酶聯免疫吸附試驗內容的訓練力度，也收到了一定的效果，以下談談我們的做法及效果。
1精選考核內容，以適應臨床實踐的需要
考核內容的選擇上以圍繞臨床實際進行選擇，真正使學生做到學以致用。不但要讓學生了解、掌握先進的免疫學檢驗技術和操作方法，還必須著重培養學生的創造性思維和綜合分析問題的能力，從而全面提高學生素質［2］。ELISA由于操作簡單、靈敏度高、可定性定量，在臨床檢驗診斷中應用最為廣泛。常用于如病毒性肝炎、艾滋病、皰疹等傳染性疾病的檢測診斷，還常用于補體、免疫球蛋白和腫瘤標志物的檢測。要想在有限的課時里完成諸多的內容訓練，顯然是不現實的。因此我們僅選擇了最具有代表性的“乙肝兩對半”檢測作為該技術的訓練及考核內容。“乙肝兩對半”共有五項檢測項目，即HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb，實驗中所需要的實驗器材均能由檢驗實驗室提供，易于準備，給學生提供了選擇和發揮的空間。實驗過程中所需要的待測血清標本為陽性或陰性標準物，不具傳染性，保證了學生實驗的安全性。學生只要掌握了“乙肝兩對半”的檢驗程序和檢驗方法，其他在臨床上需要用ELISA技術檢測的常見項目則觸類旁通，能起到事半功倍的效果，至于少見的、較為復雜的檢測項目可以在日后的實習及工作中繼續學習。
2調整考核內容，可行性及針對性強
酶聯免疫吸附試驗教學內容在學時安排上有6課時，理論與實驗課課時之比為1．1。以往的教學形式為先理論授課，教師講解實驗的原理及檢驗程序，實驗教學中教師講解后進行示范教學，學生照葫蘆畫瓢的再做實驗;實驗操作考核只設HBsAg項目的考核，考核項目單一、形式單一。學生只需完成實驗操作，報告結果即可。而現行的考核內容是“乙肝兩對半”的共五項檢測項目，各個項目的檢驗過程如標本的稀釋、試劑選擇、加樣順序有所不一。從限制考核時間的角度考慮，學生在考核時隨機抽考其中的一個項目，由考生自主選擇所需物品進行實驗操作，這樣增加了考試的隨機性和靈活性。雖然抽考使得考核難度增加，但能強化學生對ELISA檢測乙肝兩對半操作步驟的理解。當學生抽到題目后，在熟悉操作步驟的基礎上，只要懂得該項目檢測時需注意的細節，如檢測HBcAb需將血清稀釋50倍，HBeAb的檢測需加入中和試劑，學生在對離心機、水浴箱及微量移液器的使用相當熟悉的基礎上，不難將標本中的結果如實地檢測出來。
3考核的形式
學生重理論、輕實驗的現象普遍存在，有的學生每操作一步就看一下筆記，或者是詢問其他同學，有的學生甚至希望教師能一步步的教，因而學生對酶聯免疫吸附試驗缺乏系統的認知。我們將考核的形式設計有理論測試(占30分)和操作考核(占70分)。通過調整考核內容，將能力培養貫穿于整個訓練過程，將單純理論教學融合于實驗教學中，能把理論知識激活，也強化了學生的實驗操作能力及解決問題、分析問題能力。理論測試采用本教研室的計算機交互平臺進行，根據教學內容特點，理論測試我們進行這樣的設計，首先收集乙肝兩對半檢測相關試題，建立題庫，內容涉及實驗原理、操作、材料、結果觀察及臨床意義。如(1)乙肝兩對半檢測涉及ELISA的哪些原理?分別檢測什么項目?(2)通過各反應孔顯色，判斷疫苗接種者、病毒攜帶者、“大三陽”、“小三陽”;(3)手工洗滌有何要求;(4)加終止液的目的是什么;(5)ELISA常用的酶是哪種?其底物是什么。共組10套試題，學生抽簽后通過計算機交互平臺指向性地發布試題、進行考試。考慮到學生對理論考試容易產生畏難情緒，在題型的設計上，設有填充題，標示題、連線題及填空題等，內容直觀、清晰，學生“寓考于樂”，在輕松愉快的心理環境下地完成理論測試。
4考試評分嚴謹，設計合理
理論考核從試題集中抽取出6道題組卷，每題5分，共30分。操作考核的評分項目包括:專業素質(衣著儀表、考試態度、紀律)5分;實驗準備(實驗用品、試劑的預處理、標本處理、標記記錄)5分;實驗步驟(加樣、微量移液器的使用、孵育、洗滌、顯色)35分，結果觀察10分;操作后清場(試劑、器材歸位、實驗臺面清理)5分，綜合評價(規定時間完成、實驗后清場、消毒等)10分，共70分。評分標準于考試前告知學生，給學生能充分地復習和準備，注意操作細節，提高考試質量。考試時每個學生獨立完成試驗，教師全程監考，及時對出錯環節扣分，評出總分。
5效果分析
在酶聯免疫吸附試驗的實驗教學中，采用考核方式，取得了以下成效。
5．1利于調動學生的主觀能動性，激發起學習的熱情
實驗操作考核綜合反映出學生的實驗預習、實驗過程和實驗態度等各方面的表現。考核成績占期末總成績的30%，將學生實驗考核計入課程總成績后，學生上實驗課的目的性增強，課上都搶著做實驗，從以往實驗缺乏主動性，不預習，不復習，變為積極思考，認真準備。實驗報告抄襲現象也明顯減少，改變了重理論輕實踐的現象［3］。從學生提出的問題，如溶血標本可以檢測“乙肝兩對半”嗎?如果用溶血標本檢測，會有什么影響，會影響什么試劑?從這些問題的提出可以看出，學生懂得對實驗進行思考，也懂得遇到問題主動和老師商量，學生不斷發現問題、思考問題、解決問題的能力得到提高。
5．2獨立工作能力的培養
獨立工作能力是一個醫學檢驗工作者最基本素質，中職生畢業后就業單位多是基層醫院，基層醫院的檢驗科可能只有1至2名檢驗員，每天的檢驗工作任務都要獨立完成。因而學生在就學期間即應注重獨立工作能力培養。在實驗考核過程中，實驗物品的選擇、擺放，實驗結束后操作臺的清理等，是學生自己準備和獨立完成。學生在考核時需考慮到考核時間的限制，因此只有熟悉基本的理論知識、熟練基本操作，才能在規定時間內完成實驗，得出正確的結果，考試前不做好準備實驗將無法順利完成。
5．3實驗基本技能的訓練
由于酶聯免疫吸附試驗涉及環節多，通過考試能綜合考核學生的基本實驗技術，如移液管的準確吸樣，血清等倍稀釋的方法;能考察學生對常用儀器設備如離心機、恒溫孵育箱、酶標儀、洗板機的操作;在對血清標本進行檢測時，使用過的物品如棉簽、試管、注射器的正確處置，能增強學生的無菌操作技術和觀念。
5．4學生的評價及反饋
此考核方案在兩屆學生進行了實施，通過操作考核，學生們得到較為系統的訓練，對ELISA檢測乙肝兩對半的整個流程有了較為深刻的認識。有必要開展，通過考核能更好地將理論與實踐相結合，學生能自如地、成功地檢測出標準物血清標本的正確結果，同時也很有成就感，增強了對實習及將來的工作的信心。在對2013級的學生進行實習情況跟蹤、訪談中得知，學生普遍認為，ELISA技術在臨床免疫檢驗診斷中應用廣泛，用此技術檢測的項目多，工作量較大。由于在操作考核強化了技能，在實習老師的指導下，能很快地進入角色，增強了工作自信心。對學生進行實驗考核的同時，也對教師提出了更高要求。教師準備的理論測試問題在內容上需與臨床免疫檢驗接軌，使考核更科學合理化。規范實驗教學，嚴謹、規范示作好示教。學生操作過程中，巡視督查，及時糾正學生的錯誤。以考促學法強化酶聯免疫吸附試驗的實驗教學，補充和完善了免疫學檢驗實驗教學的內容和方法，也希望能以此提高學生對其他課程學習的主動性及激發起學習的熱情。
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