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    如此一來，景定對此感到憤怒不已，當即下令今川氏定率五千余軍勢進駐界町，在芹澤信胤、高橋又五郎、小倉家房等人的協助下，將界町之中所有的南蠻寺一一搗毀，并沒收界町葡萄牙商人的財產、船只等。

    期間，上杉軍還將拒不配合、妨礙執法的天主教徒、神父盡數逮捕，隨后就在景定的默許下押至京都六條河畔附近斬首示眾。

    之后，景定還以上杉將軍家的名義還勒令界町之中凡是信仰天主教者必須改宗，并令其踩踏畫有上帝或圣子的畫像（影踏），否則將流放至蝦夷地。

    已經在界町傳教數年的加斯帕爾·比勒拉神父為了阻止上杉將軍家對天主教徒的迫害，便前往二條城，要求登城面見八條景定。

    景定倒是對此問心無愧，反而向加斯帕爾·比勒拉神父提出了強行對扶桑百姓進行傳教、將扶桑人誘拐并買賣、葡萄牙人食用孩童、將扶桑各國情報提供給本國之人、教會裹挾諸多身份底下之人，有爆發一揆的傾向等多條質詢。

    由于葡萄牙人在九州所做不法之事甚多，導致加斯帕爾·比勒拉神父幾乎無法對上述質詢進行辯解。

    最后，加斯帕爾·比勒拉神父只能無功而返。

    之后，景定又與上杉景信、長尾景秋、畠山常重、加地春綱、今川氏定、四條虎定等上杉將軍家重臣們一同聯名簽署了伴天連（意為傳教士，是葡萄牙語「padre」一詞日語音譯的漢字寫法）追放令。同時，還派遣使者將伴天連追放令送至江戶城，交由上杉謙信、上杉氏虎來閱覽。

    元龜三年，四月十五日，上午。

    八條家家臣沼田右光當面將伴天連追放令交給了加斯帕爾·比勒拉神父。

    其內容除了傳達給大名之外，還在石清水八幡宮門前、界町、京都、奈良、高野山、尹勢神宮、鐮倉鶴崗八幡宮、西本愿寺、東本愿寺、比叡山延歷寺、東大寺、興福寺等地豎牌布告。

    第一條是「扶桑自古以來信奉神佛，從天主教之國傳授邪法一事，甚為不妥」。景定直接將扶桑擺在了天主教國家的對立面，禁止天主教即邪教的布教。

    第二、天主教擅自將九州的大名和國人領主變成信徒，令他們破壞寺院神社。大名和國人領主的領地并非是一成不變的，也不是上杉將軍家永久交給他們（上杉將軍家擁有轉封和更換領主的權限），所以所有人都應遵守上杉將軍家所頒下的法度。

    第三、傳教會破壞扶桑國之佛法，是歪門邪道，所以不能讓傳教士待在扶桑境內，限他們于二十天之內離開扶桑回國。

    第四、上杉將軍家可以保障黑船（來自葡萄牙的貿易船只）的貿易，只要不妨礙扶桑的佛法，商人也好，其他人也好，都可以從天主教國家來扶桑。

    這就明示了上杉將軍家促進貿易的政策。不過，傳教與貿易關系緊密、難以分開，這就使得上杉將軍家在推進禁教法令過程中遭遇很大的阻礙。

    第五、擁有二百町、五千石以上知行的領主若想成為天主教徒必須得到上杉

    將軍家的許可才行，不然將會處以改易。

    隨著伴天連追放令在近畿諸國率先公布后，可謂是一石激起千層浪。

    雖然近畿諸國和九州不同，不像以北九州為中心有高達十幾萬天主教徒存在，至少界町、武庫湊等攝津沿海地區還是有數萬天主教徒存在，對此上杉將軍家完全不能小覷。

    加斯帕爾·比勒拉神父為了不讓近畿諸國的天主教信徒對信仰產生自我否定，讓他們不畏懼殉教，甚至還會一戶戶地走訪天主教信徒，激勵他們。

    當時的界町之中有七千余天主教信徒，在加斯帕爾·比勒拉神父的先后勸說下，四千余名天主教信徒選擇繼續信仰，并暗中收集武器、鎧甲，意圖發起一揆開對抗上杉將軍家的統治。

    由于事態愈發嚴重，芹澤信胤、高橋又五郎、小倉家房等人只好將迅速將那些頑固的天主教信徒登記上名簿，排在第一位的自然是加斯帕爾·比勒拉神父。
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