第(1/3)頁 白書龍嘴上說著讓楊舟試一試,心里卻是想著等楊舟遇到挫折,就勸他更改課題,反正都說了給楊舟半年時間。 要是現在就潑冷水,那就是打自己的臉了。 接下來白書龍果然很配合楊舟,主動詢問需要用到什么器材,需要多少經費。 他來幫著協調。 楊舟計算過經費,最大的開銷便是蛋白酶。 也就是用于基因編輯的cas9蛋白(cas9核酸酶)。 rispr/cas9是細菌和古細菌在長期演化過程中形成的一種適應性免疫防御系統。 crispr/cas9 系統通過將入侵噬菌體和質粒 dna 的片段整合到 crispr 序列中,并利用相應的 crispr rnas(crrnas)來指導cas9蛋白對同源序列降解,從而提供免疫性。 人工改造過的cas9/sgrna系統通過sgrna(short guide rna)引導cas9蛋白識別并剪切帶有sgrna靶點的雙鏈dna,就可以用于基因敲除和精確編輯dna等操作。 不管是動物和植物,都有dna結構,那就可以用cas9技術。 如果將dna看成是一卷老式膠片,其中有一段膠片想要剪切掉,那就可以用cas9蛋白酶,替代掉這段膠片,原來的膠片就失效了,而dna鏈條,也會因此而斷裂。 在dna鏈斷裂后,crispr/cas9有兩個選擇,要么直接添加堿基,破壞原有基因功能,通過沉默基因實現基因敲除,要么利用單鏈dna模板,引入新的序列,對基因進行編輯。 同樣是dna膠片,轉基因相當于用另一卷膠片,硬生生地卡在原有的膠片上,讓原有的膠片,表現出不同的畫面。 轉基因大豆,就是讓大豆的dna片段添加上矮牽牛的抗性基因,因為矮牽牛的抗性基因具備抵抗除草劑草甘膦的能力,這就可以讓轉基因大豆不被除草劑殺死,而雜草全部會被除草劑滅殺。 這就是兩者的區別。 嚴格來說,轉基因也是基因編輯的一種,cas9基因剪輯在做減法,轉基因則是在做加法。 楊舟目前準備用的就是減法。 想要實現減法也不是那么容易的,因為基因剪輯的蛋白酶也需要設計,其中最關鍵的一點便是獲取帶有sgrna靶點的雙鏈dna。 cas9是一個剪輯器,比如剪輯蘿卜的基因,那總要知道該剪輯哪一段。 現在不少實驗室有設計cas9的業務,剪輯器的費用也有所不同,有的成功率低,價格就便宜,有的成功率高,價格就比較昂貴。 按照10微克計算,價格在1500元到15000元之間,數量不同價格也有所區別。 楊舟選擇在賽默飛世爾科技公司訂購,這是一家全球實驗儀器器材供應商,有各種實驗試劑、器材可以供應。 第(1/3)頁